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支原體qpcr檢測試劑盒(4盒裝)

支原體qpcr檢測試劑盒(4盒裝)
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價格:電議

型號:11-9025

采購度:48    原產地:中國大陸

發布時間:2023/11/15 15:28:32

產品簡介:在常規PCR基礎上,將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記,使PCR擴增后的產物帶有熒光,利用熒光信號的變化和配套軟件,進行DNA擴增反應的實時監測,簡稱qPCR。

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詳細信息
 qPCR Kit(經典法)

Venor®Gem qEP

 

品名

貨號

規格

價格

qPCR Kit   (經典法)

Venor®Gem qEP

11-9025

25次/盒

詢價

11-9100

100次/盒

詢價

11-9250

250次/盒

詢價


 

支原體熒光定量PCR又稱,qPCR法:

 

支原體熒光定量PCR法(qPCR):是在常規PCR基礎上,將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記,使PCR擴增后的產物帶有熒光,利用熒光信號的變化和配套軟件,進行DNA擴增反應的實時監測,簡稱qPCR。

優點:

①靈敏度高、特異性強。

②時間短,2-3小時出結果

③檢測結果可定量

④操作簡便

 

缺點:

①對于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結果會出現假陽性。(可用培養法做補充驗證)

②不同廠家生產的試劑盒質量差異巨大(由于引物及內在設計不同),需謹慎選擇,盡量在專業人員推薦指導下使用。

『支原體qPCR檢測試劑盒』介紹

德國MB公司生產的支原體qPCR檢測試劑盒(均為探針法檢測),依據操作步驟的細微差別, 分『經典法』和『一步法』兩種。   

此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產品,具有以下獨特的優點:

①經典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

 

②高特異性,一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種(涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體),根據序列一致性,至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單,易于觀察(使用MB的試劑盒,下表中列出的支原體物種均為陽性,其他微生物或真核細胞均為陰性,無交叉反應)。

 

③高靈敏度,MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒經典法檢測限可達到≤10CFU/ml。

MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒一步法檢測限≥50個基因組/反應。

 

④MB公司有相應配套的10CFU/100CFU的敏感度測試的標準品,便于方法學驗證。

⑤MB公司有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證。

⑥MB公司有相應配套的支原體絕對定量標準品,便于*后定量檢測。

 

支原體qPCR檢測試劑盒特點

 

1.內控對照為獨立包裝,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性,一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種(包括歐洲藥典規定的9種支原體)。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3.高靈敏度,檢測限可達到≤10CFU/ml。

4.相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證。

5.有相應配套的支原體絕對定量標準品,便于*后定量檢測。

 

支原體qPCR檢測試劑盒操作步驟

第1步:樣本處理

a.細胞培養上清

b. 生物藥或需遵循藥典的樣本

說明:①樣品基質可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。

    ②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度。

建議:樣本做DNA抽提處理,實現靈敏度。

推薦:德國MB公司生產的專用支原體DNA提取試劑盒

Venor® Gem Sample Preparation Kit

該DNA抽提試劑盒已經過廣泛驗證。

 

第2步:試劑制備

a.凍干粉溶解

b. 反應體系制備

b1) 樣品為細胞上清篩查——反應體系制備

b2) 樣品為生物藥——反應體系制備

第3步:啟動熒光定量PCR儀

第4步:結果判別

FAM通道:檢測支原體熒光信號。HEX通道:檢測內控對照熒光信號。

支原體DNA和內控DNA存在信號的競爭性抑制。

支原體DNA越多,FAM通道信號越高,檢測內控對照的HEX通道信號越低。

定量需基于Ct值和DNA標準曲線。

Ct<40為陽性結果。Ct≥40為陰性結果。

示意圖:

 

儲存條件

2~8℃保存至少12個月。復溶后-18℃以下保存。

 

效期

1年6個月

更新時間:2024/1/4 13:33:30

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