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3類『支原體檢測標準品』的區別及用途

點擊次數:39   發布時間:2024/1/28 23:41:46

 在醫學和生物學領域,支原體是一類引起感染的細菌,對人類和動物的健康構成潛在威脅。在生物制品,細胞質量相關項目中用到的生物藥,需要經過支原體檢測,以保障臨床項目的安全。

 

在用qPCR的方法進行支原體檢測的時候,除了檢測類的試劑盒,還需要用到支原體標準品。本期內容,我們來聊聊支原體檢測標準品的作用及意義,以及德國MB公司的三大類支原體檢測標準品的不同功能。
 

支原體標準品的作用


質量控制

作為已知濃度的標準,支原體標準品可用于驗證實驗室的分析方法的準確性和可重復性。實驗室人員可以通過與標準品進行對比,及時發現潛在的誤差,從而提高支原體檢測的準確性。

 

方法驗證

支原體標準品可用于驗證藥典中,支原體qPCR檢測方法。通過使用已知濃度的標準品,可以評估qPCR方法的敏感性、特異性和準確性。

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德國MB支原體檢測標準品


靈敏度標準品

歐洲藥典第2.6.7章(EP 2.6.7)和日本藥典第G3章(JP G3)詳細描述了用于支原體的核酸擴增技術(NAT)等檢測方法。如果將這些檢測方法用作傳統培養法的替代方法,在靈敏度方面,要求在樣品體積中每毫升檢測到10個菌落形成單位(CFU/ml)。

德國Minerva Biolabs公司的的10CFU靈敏度標準品含有滅活支原體(10CFU標準品3管/盒),用于評判實驗的靈敏度。

使用時重懸在感興趣的樣品基質中(如EP 2.6.7 / JP G3),用所應用的方法進行陽性測試。大量實驗表明,核酸法檢測中,支原體DNA提取可以幫助實驗實現更高的靈敏度,提取后的10CFU提取物可直接用于PCR。


特異性標準品

德國MB公司生產的特異性標準品(1管支原體基因組DNA(≈10ng)+ 1管 Tris緩沖液(200μl)/盒)中,含有從目標微生物中,以低培養傳代數提取的基因組DNA。用標準化的方法分析DNA起始物質,以確定DNA的完整性和數量。*終的DNA提取部分測序,以確認物種的身份。

德國MB公司生產的特異性標準品,用于PCR和qPCR方法對支原體物種的特異性檢查。


PCR定量標準品

PCR定量標準包含從定義的微生物中提取的基因組DNA,在低培養傳代數。用標準化的方法分析DNA起始物質,以確定DNA的完整性和數量。只有瓊脂糖凝膠中顯示> 10 kb條帶且OD260/280 > 1.8的純完整DNA才能用于制造這些產品。DNA被部分測序以確認物種的身份。

德國MB公司的PCR定量標準包含目標微生物基因組拷貝的制定數量。因此,德國MB公司的定量標準品非常適合在qPCR中生成DNA標準曲線。

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